Fàilte don artaigil theicnigeach seo mu loidhne cealla T47D. Ann an raon rannsachadh saidheansail, tha innealan agus goireasan mionaideach air leth cudromach airson adhartachadh agus tuigse air diofar raointean sgrùdaidh. Anns a’ cho-theacsa seo, tha loidhnichean cealla air fàs gu bhith nan inneal luachmhor, gu sònraichte ann an raon bith-eòlas agus leigheas. Gu sònraichte, tha an loidhne cealla T47D air seasamh a-mach airson a iomchaidheachd agus cho feumail sa tha e ann an grunn rannsachadh co-cheangailte ri aillse broilleach agus na leigheasan aige. Tron artaigil seo, nì sinn sgrùdadh mionaideach air feartan, tagraidhean agus buannachdan loidhne cealla T47D, a ’toirt seachad sealladh soilleir agus pongail air an inneal luachmhor seo anns an raon saidheansail.
Ro-ràdh don Loidhne Ceallach T47D
Tha an T47D Cell Line na inneal luachmhor airson rannsachadh ann an raon bith-eòlas cealla agus oncology. Is e loidhne cealla a th’ ann a thàinig bho tumhair broilleach daonna, air a chleachdadh gu farsaing ann an sgrùdaidhean air aillse broilleach agus mar mhodail airson rannsachadh co-cheangailte ris an hormone estrogen. An ath rud, nì sinn sgrùdadh air prìomh fheartan agus iarrtasan na loidhne cealla seo cho cudromach.
Is e aon de na buannachdan as sònraichte a th’ aig an T47D Cell Line a chomas fàs ann an làthaireachd estrogen, a tha ga dhèanamh na dheagh mhodail airson sgrùdadh a dhèanamh air giùlan cheallan aillse an urra ris an hormone seo. Chaidh an loidhne cealla seo a chleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air dòighean gnìomh estrogens ann an leasachadh, fàs agus adhartas aillse broilleach, a bharrachd air measadh èifeachdas dhrogaichean a tha ag amas air casg a chuir air comharran estrogenic.
Is e feart buntainneach eile den T47D Cell Line an comas aige mamospheres a chruthachadh, structaran coltach ri tumhan ann an trì tomhasan, a leigeas le sgrùdadh a dhèanamh air ionnsaigh agus imrich cheallan aillse ann an àrainneachd a tha nas coltaiche ri fìrinn in vivo. Tha am modail in vitro seo air a bhith feumail airson a bhith a’ sgrùdadh freagairt cheallan T47D gu diofar leigheasan antitumor, a bharrachd air a bhith a’ measadh comas bun-cheallan aillse gus mamospheres ùra a chruthachadh.
Feartan an Loidhne Ceallach T47D
Tha an loidhne cealla T47D na roghainn air leth airson luchd-rannsachaidh ann an raon bith-eòlas cealla agus oncology. Tha an loidhne cealla broilleach daonna seo air a chleachdadh gu farsaing air sgàth a fheartan sònraichte a tha ga eadar-dhealachadh bho loidhnichean cealla eile.
1. Tùs na loidhne cealla: Chaidh T47D a stèidheachadh bho biopsy de stuth broilleach daonna, gu sònraichte carcinoma ductal in-shìoladh. Tha a thùs daonna a’ toirt fìor bhuntanas dha ann an sgrùdaidhean air pathology broilleach agus a’ ceadachadh tuigse nas fheàrr fhaighinn air na h-innealan bith-eòlasach agus moileciuil a tha an sàs ann an leasachadh aillse broilleach.
2. Hormonal abairt: Is e feart sònraichte de loidhne cealla T47D a chomas air gabhadairean estrogen (ER) agus progesterone (PR) a chuir an cèill. Tha seo ga dhèanamh na inneal luachmhor airson rannsachadh co-cheangailte ri buaidh nan hormonaichean sin air fàs agus leudachadh cealla broilleach. A bharrachd air an sin, faodar T47D a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air èifeachd dhrogaichean a tha ag amas air na gabhadairean hormona sin ann an làimhseachadh aillse broilleach a tha mothachail air hormona.
3. Cugallachd a thaobh leigheasan: Thathas air sealltainn gu bheil an loidhne cealla T47D mothachail air grunn leigheasan teirpeach, ga dhèanamh freagarrach airson sgrùdaidhean strì agus leasachadh dòighean teirpeach ùra. A bharrachd air a bhith mothachail air leigheasan gnàthach leithid radiotherapy agus chemotherapy, faodar T47D a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air èifeachd leigheasan sònraichte cuimsichte, a’ toirt a-steach luchd-dìon tyrosine kinase agus leigheasan a tha ag amas air slighe comharran gabhadair fàis epidermal.
Cultar agus dòighean cumail suas Loidhne Cell T47D
Tha àiteachadh agus cumail suas ceart loidhne cealla T47D deatamach gus dèanamh cinnteach à toraidhean earbsach agus ath-riochdachadh ann an rannsachadh agus measaidhean. Tha na dòighean a thathar a’ moladh airson fàs agus cumail suas na loidhne cealla seo air an liostadh gu h-ìosal:
- - Ullaich meadhan cultair iomchaidh, leithid meadhan riatanach as ìsle (MEM) le taic bho 10% serum bò fetal (FBS).
- - Dèan cinnteach gu bheil pH a’ mheadhan eadar 7.2 agus 7.4 agus an teòthachd 37 ° C.
- - Cleachd pleitean cultair sterile agus bi cinnteach gun làimhsich thu an loidhne cealla fo chumhachan aseptic gus truailleadh a sheachnadh.
- - Leacaich na ceallan gu sgiobalta ann an amar uisge 37 ° C agus gluais iad chun mheadhan cultair ro bhlàth iomchaidh.
- - Goir na ceallan ann an àile iomchaidh le solar 2% CO5 gus an dùmhlachd as fheàrr a thoirt seachad.
Cumail suas agus fo-chultar:
- - Thoir sùil gu cunbhalach air coltas agus ionracas nan ceallan fo mhiocroscop gus dèanamh cinnteach gu bheil iad ann an deagh staid.
- - Nuair a ruigeas na ceallan confluency 80-90%, dealaich na ceallan bho uachdar a ’chultair le bhith a’ cleachdadh trypsin-EDTA agus fo-chultar iad gu truinnsear ùr.
- - Cùm clàr mionaideach de gach ceum fo-chultar, a’ toirt a-steach ceann-latha agus àireamh nan earrannan a chaidh a dhèanamh.
- - Ath-nuadhaich am meadhan cultair a h-uile dhà no trì latha gus beathachadh iomchaidh a thoirt seachad agus àrainneachd fàbharach a chumail airson fàs cheallan.
- - Reothaich ceallan a-rithist gach 6-8 seachdainean gus am bi iad comasach a ghleidheadh agus gus casg a chuir air cruinneachadh de ana-cainnt ginteil.
Smachdan càileachd agus deuchainnean meanbh-bhitheòlasach:
- - Dèan deuchainnean meanbh-bhitheòlasach gu cunbhalach gus faighinn a-mach gu bheil truailleadh bacterial, fungach no bhìorasach ann. A’ cleachdadh dòighean lorg DNA sònraichte agus cultar.
- - A’ dearbhadh dearbhteachd agus purrachd na loidhne cealla a’ cleachdadh mion-sgrùdadh ginteil agus dòighean coimeas ìomhaigh.
- - A’ dèanamh deuchainnean gnìomhachd cealla agus fàis gus ionracas agus freagairt cheallan do dhiofar bhrosnachaidhean no leigheasan a mheasadh.
- - A’ coileanadh abairt gine agus mion-sgrùdadh proteomics airson sgrùdaidhean nas mionaidiche air uidheamachdan bith-eòlasach agus eadar-obrachaidhean loidhne cealla T47D.
Cleachdadh Loidhne Cell T47D ann an rannsachadh saidheansail
Tha an loidhne cealla T47D air a chleachdadh gu farsaing ann an rannsachadh saidheansail air sgàth a chomas a bhith mar sgàthan air feartan tumors broilleach daonna. Tha na ceallan sin nan inneal luachmhor airson a bhith a’ sgrùdadh adhartas aillse broilleach agus a fhreagairt do ghrunn leigheasan teirpeach.
Tha cleachdadh loidhne cealla T47D eadar-mheasgte agus a’ dol bho bhith a’ measadh èifeachd dhrogaichean ùra gu bhith a’ tuigsinn nan dòighean moileciuil a tha mar bhunait air leasachadh aillse broilleach. Tha cuid de na prìomh raointean rannsachaidh ann an a thathar a’ cleachdadh Tha an loidhne cealla seo a’ toirt a-steach:
- Sgrùdadh air freagairt do leigheasan cuimsichte: Tha an loidhne cealla T47D air a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air freagairt cheallan aillse gu diofar leigheasan, leithid hormone therapy no leigheas air a stiùireadh an aghaidh HER2. Tha seo ga dhèanamh comasach èifeachdas dhrogaichean a dhearbhadh agus ro-innleachdan teirpeach nas èifeachdaiche a leasachadh.
- Sgrùdadh air adhartas aillse broilleach: Tha sgrùdadh air adhartas aillse broilleach deatamach gus tuigse fhaighinn air mar a leasaicheas an galar agus mar as urrainnear a chasg. Tha an loidhne cealla T47D air a chleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air na h-innealan moileciuil a bhrosnaicheas fàs tumhan broilleach agus ionnsaigh air stuthan fallain.
- Leasachadh mhodalan rannsachaidh ann an aillse broilleach: Chaidh an loidhne cealla T47D a chleachdadh gus modalan deuchainneach de fhigheagan tumhair broilleach a leasachadh a leigeas leinn atharrais nas cinntiche a dhèanamh air fìrinn aillse broilleach san obair-lann. Tha na modailean sin deatamach airson drogaichean ùra a dhearbhadh agus tuigse nas fheàrr fhaighinn air bith-eòlas aillse broilleach.
Ann an geàrr-chunntas, tha an loidhne cealla T47D na inneal riatanach ann an rannsachadh saidheansail ann an raon aillse broilleach. Tha an sùbailteachd agus an comas aige feartan tumors broilleach daonna a nochdadh ga fhàgail na charaid luachmhor ann a bhith a’ lorg leigheasan ùra agus tuigse air na h-innealan moileciuil a tha a’ stiùireadh leasachadh a’ ghalair.
Buannachdan agus eas-bhuannachdan bho bhith a’ cleachdadh Loidhne Ceallach T47D
Nuair a thathar a’ beachdachadh air cleachdadh an T47D Cell Line, tha e cudromach measadh a dhèanamh air an buannachdan agus eas-bhuannachdan a dh’ fhaodadh a bhith na lùib. Gu h-ìosal tha cuid de phrìomh phuingean a dh ’fhaodadh do chuideachadh le bhith a’ tuigsinn na loidhne cealla sònraichte seo nas fheàrr:
Buannachdan:
- Ruigsinneachd: Tha an loidhne cealla T47D ruigsinneach gu farsaing, a bhios ga chleachdadh ann an grunn rannsachadh saidheansail co-cheangailte ri aillse broilleach.
- Predictability: Tha an loidhne cealla seo ainmeil airson a sheasmhachd agus cunbhalachd mar fhreagairt do dhiofar leigheasan agus riochdairean, ga dhèanamh na inneal earbsach airson deuchainnean agus sgrùdaidhean.
- Co-fhreagarrachd: Tha an loidhne cealla T47D co-chòrdail ri raon farsaing de dhòighean obair-lann, a ’ceadachadh a chleachdadh ann an grunn dheuchainnean agus anailis, a’ comasachadh faighinn dàta cudromach agus cinnteach.
Eas-bhuannachdan:
- Cuingealachaidhean: A dh'aindeoin cho measail 'sa tha e agus cho feumail' sa tha e, tha crìochan aig an T47D Cellular Line. Mar eisimpleir, tha tùs an tumhair aige a’ tighinn bho sheòrsa sònraichte de aillse broilleach, a dh’ fhaodadh cuingealachadh a dhèanamh air iomchaidheachd ann an sgrùdaidhean co-cheangailte ri subtypes eile de aillse broilleach.
- Tar-thruailleadh: Tha cunnart ann gun tèid tar-thruailleadh a dhèanamh leis gu bheil an loidhne cealla sònraichte seo air a chleachdadh gu farsaing ann an iomadh deuchainn-lann, a dh’ fhaodadh buaidh a thoirt air ionracas nan toraidhean mura tèid an rabhadh ceart a ghabhail.
- Iomadachd ginteil: Chan eil an loidhne cealla T47D gu tur a’ riochdachadh an iomadachd ginteil a lorgar ann an euslaintich aillse broilleach, a dh’ fhaodadh buaidh a thoirt air mìneachadh thoraidhean.
Gu crìch, tha buannachdan mòra aig an T47D Cell Line a thaobh ruigsinneachd, ro-innse agus co-chòrdalachd, ga fhàgail na roghainn tarraingeach dha mòran de luchd-rannsachaidh ann an raon aillse broilleach. Ach, tha e cudromach toirt fa-near a chuingealachaidhean, leithid a bhith a’ cuingealachadh ri fo-sheòrsa sònraichte de aillse broilleach agus an cunnart a dh’ fhaodadh a bhith ann an tar-thruailleadh. Nuair a thathar a 'beachdachadh air cleachdadh na loidhne cealla seo, tha e riatanach measadh a dhèanamh gu faiceallach na buannachdan agus na h-eas-bhuannachdan aige ann an co-theacsa gach sgrùdaidh sònraichte.
Sgrùdaidhean ro-clionaigeach agus clionaigeach a’ cleachdadh an loidhne cealla T47D
Chaidh an T47D Cell Line a chleachdadh gu farsaing ann an sgrùdaidhean preclinical agus clionaigeach gus sgrùdadh a dhèanamh air diofar thaobhan co-cheangailte ri aillse broilleach. Tha na sgrùdaidhean sin air fiosrachadh luachmhor a thoirt seachad mu bhith-eòlas an tumhair agus a fhreagairt do dhiofar leigheasan, a’ cur ri adhartachadh rannsachadh san raon seo.
Tha sgrùdaidhean ro-clionaigeach a’ cleachdadh an T47D Cell Line air sealltainn gu bheil e feumail ann a bhith ag aithneachadh ghinean ùra a tha an sàs ann an adhartas aillse broilleach. A bharrachd air an sin, chaidh an loidhne cealla seo a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air èifeachd dhrogaichean ann an làimhseachadh tumors broilleach, a’ ceadachadh leigheasan nas èifeachdaiche agus nas pearsanta a thaghadh dha euslaintich.
Ann an sgrùdaidhean clionaigeach, chaidh an T47D Cell Line a chleachdadh mar mhodail gus sgrùdadh a dhèanamh air freagairt tumors broilleach hormonail gu leigheasan endocrine. Tha na sgrùdaidhean sin air bith-chomharran a chomharrachadh a bhios a’ ro-innse freagairt do làimhseachadh agus a’ stiùireadh taghadh leigheasan sònraichte. A bharrachd air an sin, chaidh an T47D Cell Line a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air puinnseanta agus èifeachd dhrogaichean ùra ann an deuchainnean clionaigeach, a’ brosnachadh leasachadh leigheasan nas sàbhailte agus nas èifeachdaiche airson euslaintich aillse broilleach.
Eadar-obrachaidhean agus freagairtean Loidhne Cell T47D gu diofar bhrosnachaidhean
Tha na sgrùdaidhean a chaidh a dhèanamh air sealltainn na diofar eadar-obrachaidhean agus freagairtean a dh’ fhaodadh a bhith aig an T47D Cell Line nuair a tha diofar bhrosnachaidhean ann. Gu h-ìosal tha na prìomh cho-dhùnaidhean a fhuaireadh:
1. Buaidh nochdadh do hormona:
- Tha an T47D Cell Line air deagh fhreagairt a nochdadh do bhith fosgailte do hormonaichean leithid estrogen, a chuir ri bhith ga chleachdadh mar mhodail ann an sgrùdaidhean co-cheangailte ri aillse broilleach a tha an urra ri hormona.
- Thathas cuideachd air sealltainn gu bheil làthaireachd hormonaichean a’ toirt buaidh air leudachadh cealla agus imrich, a’ moladh an com-pàirt aca ann an leasachadh agus adhartas aillse broilleach.
- A bharrachd air an sin, chaidh fhaicinn gu bheil an T47D Cell Line a ’freagairt gu eadar-dhealaichte ri bhith fosgailte do dhiofar sheòrsaichean estrogens, a tha ag àrdachadh comas roghnachd anns an eadar-obrachadh leis na todhar sin.
2. Freagairt do leigheas cuimsichte:
- Thathas air sealltainn gu bheil an loidhne cealla T47D mothachail air leigheas a tha air a stiùireadh an aghaidh an gabhadair estrogen, a’ nochdadh lùghdachadh ann an iomadachadh cealla agus inntrigeadh apoptosis.
- A bharrachd air an sin, chaidh fhaicinn gum faod casg air slighe comharran PI3K / Akt / mTOR droch bhuaidh a thoirt air mairsinn agus fàs nan ceallan sin.
- Tha na co-dhùnaidhean sin a’ toirt taic do bhith a’ cleachdadh an T47D Cell Line mar inneal èifeachdach ann a bhith a’ measadh leigheasan ùra cuimsichte airson làimhseachadh aillse broilleach a tha an urra ri hormona.
3. Eadar-obrachadh le factaran eile:
- Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air freagairt an T47D Cell Line gu diofar fhactaran àrainneachd leithid cuideam oxidative, rèididheachd agus suidheachaidhean hypoxic, a’ sealltainn atharrachaidhean ann an comas obrachaidh cealla agus faireachdainn gine.
- Mar an ceudna, chaidh fhaicinn gum faod an eadar-obrachadh le ceallan an t-siostam dìon freagairt na loidhne cealla T47D atharrachadh, a tha a’ nochdadh cho cudromach sa tha meanbh-àrainneachd an tumhair ann an adhartas a’ ghalair seo.
- Tha na co-dhùnaidhean sin a’ soilleireachadh an fheum air aire a thoirt do iom-fhillteachd nan eadar-obrachaidhean a dh’ fhaodadh buaidh a thoirt air freagairt an T47D Cell Line gu diofar bhrosnachaidhean, gus tuigse nas coileanta fhaighinn air pathophysiology aillse broilleach.
Beachdachaidhean beusanta agus laghail ann a bhith a’ cleachdadh Loidhne Ceallach T47D
Tha cleachdadh na loidhne cealla T47D ann an rannsachadh saidheansail is meidigeach a’ toirt a-steach cùisean beusanta agus laghail cudromach a dh’ fheumar a thoirt fa-near. Gu h-ìosal tha cuid de phuingean buntainneach ri beachdachadh:
Dìomhaireachd dàta:
- Tha e riatanach a bhith cinnteach gu bheil an prìobhaideachd agus dìomhaireachd den dàta agus sampaill de na h-euslaintich bhon deach an loidhne cealla T47D fhaighinn.
- Feumaidh luchd-rannsachaidh na ceumannan riatanach a ghabhail gus dearbh-aithne euslaintich a dhìon, a’ dèanamh cinnteach gu bheilear a’ làimhseachadh a h-uile fiosrachadh pearsanta gun urra, a’ toirt urram do riaghailtean dìon dàta.
Cead fiosraichte:
- Tha e deatamach cead fiosraichte fhaighinn bho euslaintich mus cleachd iad an T47D Cell Line ann an rannsachadh, a’ dèanamh cinnteach gu bheil làn fhiosrachadh aig com-pàirtichean mu na h-amasan, na buannachdan agus na cunnartan a dh’ fhaodadh a bhith co-cheangailte ri cleachdadh an sampallan agus an dàta.
- Feumaidh làn shaorsa a bhith aig euslaintich co-dhùnadh a bheil iad airson pàirt a ghabhail no nach eil, gun fhulangas Gun seòrsa de chuideam no droch bhuaidh ma dhiùltas tu.
Riaghailtean laghail:
- Feumar cleachdadh an T47D Cell Line a dhèanamh ann an gèilleadh teann ris na riaghailtean agus riaghailtean laghail ionadail, nàiseanta agus eadar-nàiseanta a tha a’ riaghladh rannsachadh le bun-cheallan agus loidhnichean cealla.
- Feumaidh luchd-rannsachaidh dèanamh cinnteach gum faigh iad na ceadan agus na ceadan riatanach gus an loidhne cealla T47D a chleachdadh, a’ toirt urram do laghan seilbh inntleachdail agus còraichean euslaintich agus luchd-tabhartais.
Molaidhean airson an loidhne cealla T47D a chleachdadh gu ceart ann an deuchainnean
Gus na toraidhean as fheàrr fhaighinn anns na deuchainnean agad a’ toirt a-steach cleachdadh an T47D Cell Line, tha e cudromach cuid de mholaidhean a leantainn. Tha na molaidhean sin air an dealbhadh gus dèanamh cinnteach à cleachdadh ceart agus ionracas na loidhne cealla, a bheir gu buil toraidhean nas cruinne agus nas earbsaiche.
1. Dèan sterilization ceart: Mus tòisich thu air deuchainn sam bith, dèan cinnteach gun cuir thu sterilize an dà chuid an uidheamachd obair-lann agus am meadhan cultair a thathar a’ cleachdadh. Cleachd dòighean ceart cultar cealla gus casg a chuir air truailleadh agus dèanamh cinnteach à purrachd loidhne cealla T47D.
2. Cumail suas suidheachaidhean cultarail ceart: Tha e riatanach na suidheachaidhean cultair as fheàrr a chumail suas airson an loidhne cealla T47D. Dèan cinnteach gun toir thu seachad àrainneachd fhreagarrach le teòthachd iomchaidh, taiseachd agus suidheachaidhean pH. Cuideachd, cuimhnich gu bheil feum aig na ceallan sin air serum bò fetal (FBS) a chur ris mar stuth beathachaidh airson an fhàs as fheàrr.
3. Dèan smachdan agus ath-aithris: Gus dèanamh cinnteach à ath-riochdachadh do thoraidhean, dèan smachdan adhartach is àicheil anns gach deuchainn. Leigidh seo leat coimeas a dhèanamh agus dearbhadh an dàta agad air fhaighinn leis an T47D Cellular Line. Cuideachd, smaoinich air na deuchainnean ath-aithris co-dhiù trì tursan gus toraidhean nas cinntiche agus nas cinntiche fhaighinn.
Dùbhlain agus seallaidhean san àm ri teachd ann an rannsachadh leis an T47D Cell Line
Ann an rannsachadh leis an T47D Cell Line, faodaidh diofar dhùbhlain èirigh mar a ghluaiseas sinn a-steach don àm ri teachd. Tha na dùbhlain sin a’ dol nas fhaide na cnapan-starra teicnigeach agus saidheansail, agus cuideachd a’ toirt a-steach taobhan beusach agus practaigeach. Is e aon de na prìomh dhùbhlain a bhith a’ leasachadh gnàthachadh cultar agus protocolaidhean cumail suas loidhne cealla T47D, mar sin a’ dèanamh cinnteach à ath-riochdachadh nan toraidhean agus a’ comasachadh coimeas eadar sgrùdaidhean.
Is e dùbhlan cudromach eile a bhith a’ dèanamh an fheum as fheàrr de dhòighean làimhseachaidh ginteil ann an loidhne cealla T47D. Tha seo a’ toirt a-steach a bhith ag atharrachadh ghinean sònraichte gus an obair aca a sgrùdadh, a bharrachd air a bhith a’ toirt a-steach comharran flùraiseach gus lorg agus sealladh gine a nochdadh. ann an àm fìor. Leigidh leasachadh nan dòighean sin le barrachd tuigse fhaighinn air na h-innealan moileciuil a tha an lùib aillse broilleach agus leasachadh dòighean teirpeach ùra.
A thaobh seallaidhean san àm ri teachd ann an rannsachadh le loidhne cealla T47D, tha dùil ri fòcas nas motha air cleachdadh mhodalan trì-thaobhach an àite monolayers traidiseanta ann an soithichean cultair. Leigidh modalan trì-thaobhach a tha nas buntainniche gu fiseòlasach le atharrais nas fheàrr air àrainneachd an tumhair agus barrachd tuigse air freagairt cheallan T47D do riochdairean teirpeach. A bharrachd air an sin, thathas an dùil gun leig adhartasan ann an teicneòlas cultar bun-cheallan leasachadh air modalan organoid broilleach a bhios ag ath-aithris iom-fhillteachd stuthan daonna agus a bheir seachad àrd-ùrlar airson adhartas aillse broilleach a sgrùdadh ann an suidheachadh nas reusanta.
Cudromachd dearbhadh ginteil anns an loidhne cealla T47D
Tha dearbhadh ginteil ann an loidhne cealla T47D air leth cudromach gus dèanamh cinnteach à earbsachd agus ath-riochdachadh nan toraidhean deuchainneach. Tha an loidhne cealla T47D air a chleachdadh gu farsaing ann an rannsachadh co-cheangailte ri aillse broilleach agus tuigse air na h-innealan moileciuil a tha mar bhunait don ghalar seo. Mar sin, tha e deatamach dèanamh cinnteach gu bheil an loidhne cealla a thathar a’ cleachdadh anns na sgrùdaidhean dearbhte agus nach deach tro thruailleadh no atharrachaidhean ginteil.
Dearbhadh ginteil de cheallan T47D Faodar a choileanadh a’ cleachdadh dhòighean leithid genotyping STR agus sreath DNA mitochondrial. Tha na dòighean sin a’ ceadachadh ìomhaigh ginteil nan ceallan a thathar a’ sgrùdadh a choimeas ri pròifilean iomraidh a chaidh a stèidheachadh roimhe, a’ toirt seachad dearbhadh mionaideach air dearbhteachd na loidhne cealla. A bharrachd air an sin, faodaidh comharrachadh mùthaidhean no atharrachaidhean ginteil cuideachadh le bhith a’ lorg mhearachdan deuchainneach no tar-thruailleadh.
Tha dèanamh cinnteach à dearbhteachd ginteil loidhne cealla T47D chan ann a-mhàin cudromach gu saidheansail, ach cuideachd gu beusach. Faodaidh foillseachadh thoraidhean stèidhichte air loidhnichean cealla truaillte no ginteil atharrachadh gu bhith a’ sgaoileadh fiosrachadh ceàrr no meallta, a tha a’ lagachadh èifeachd an rannsachaidh agus a bheir droch bhuaidh air adhartas saidheansail. Mar sin, tha e riatanach smachd càileachd ginteil teann a dhèanamh anns a h-uile sgrùdadh anns a bheil loidhne cealla T47D.
Leasachaidhean a dh’ fhaodadh a bhith ann an àiteachadh agus cumail suas Loidhne Cell T47D
Is e aon dhiubh optimachadh meadhan cultair. An-dràsta, thathas a’ cleachdadh meadhan àbhaisteach anns a bheil beathachadh riatanach airson fàs cealla. Ach, chaidh fhaicinn gum faodadh cuid de phàirtean den mheadhan a bhith air an leasachadh gus fàs nas làidire a bhrosnachadh agus barrachd comas obrachaidh cealla. Dh’ fhaodadh cuid de leasachaidhean a bhith a’ toirt a-steach cuir ri factaran fàis sònraichte, beathachadh a bharrachd, no toirt air falbh co-phàirtean neo-riatanach. Dh’ fhaodadh na h-atharrachaidhean sin èifeachdas cultair àrdachadh agus cuideachadh gus an loidhne cealla a chumail nas iomchaidh san obair-lann.
Is e leasachadh eile a dh’ fhaodadh a bhith ann an àiteachadh agus cumail suas Loidhne Cell T47D a bhith a ’buileachadh dòighean reothadh is leaghadh nas èifeachdaiche. An-dràsta, faodaidh am pròiseas reothadh is leaghadh leantainn gu lùghdachadh ann an comas obrachaidh cealla agus call feartan sònraichte loidhne cealla. Gus seo a leasachadh, faodar beachdachadh air diofar dhòighean reòta, leithid cleachdadh cryoprotectants agus nitrigin leaghaidh airson gleidheadh nas fheàrr de na ceallan. A bharrachd air an sin, dh’ fhaodadh diofar ìrean leaghaidh agus dòighean ath-bheothachaidh a bhith air an sgrùdadh gus mairsinneachd cealla agus gnìomhachd a mheudachadh.
Mu dheireadh, dh’ fhaodadh leasachadh eile ann an àiteachadh agus cumail suas Loidhne Cell T47D a bhith a’ buileachadh dhòighean bith-innleadaireachd gus na ceallan atharrachadh gu ginteil. Leigidh seo le feartan sònraichte a thoirt a-steach a dh’ fhaodadh a bhith buannachdail airson àiteachadh agus làimhseachadh san obair-lann. Dh’ fhaodadh cuid de dh’ atharrachaidhean ginteil a bhith a’ toirt a-steach cus cuideam air prìomh phròtainean airson fàs cealla, cuir às do ghinean a chuireas casg air iomadachadh cealla, no toirt a-steach comharran flùraiseach gus comharrachadh agus lorg cheallan T47D ann an deuchainnean a dhèanamh comasach.
Optimization de phròtacalan deuchainneach a’ cleachdadh an loidhne cealla T47D
Tha an fheum as fheàrr de phròtacalan deuchainneach na phàirt deatamach de rannsachadh saidheansail. Ann an cùis shònraichte loidhne cealla T47D, faodaidh cleachdadh ro-innleachdan optimization àrdachadh mòr a thoirt air èifeachdas agus mionaideachd nan deuchainnean. Gu h-ìosal tha cuid de mholaidhean gus protocolaidhean deuchainneach a bharrachadh a’ cleachdadh loidhne cealla T47D:
1. Cultar cealla:
- Cleachd meadhan cultair iomchaidh a bheir seachad na beathachadh riatanach airson fàs cheallan T47D.
- Cùm teòthachd an goireadair aig 37 ° C agus thoir faireachdainn 5% CO2 gus na suidheachaidhean fàis cealla as fheàrr a chumail suas.
- Atharraich am meadhan cultair gu cunbhalach gus comas obrachaidh cealla a chumail suas agus gus metabolites puinnseanta a sheachnadh.
- Dèan reothadh agus leaghadh iomchaidh de cheallan T47D gus am bi iad comasach agus comasach.
2. Làimhseachadh agus deuchainnean:
- Stèidhich an ìre as fheàrr de dhroga no de làimhseachadh gus dèanamh cinnteach à freagairt iomchaidh de cheallan T47D gun a bhith ag adhbhrachadh puinnseanta.
- Obraich a-mach an ùine goir a tha riatanach gus na toraidhean a tha thu ag iarraidh fhaighinn, a’ beachdachadh air kinetics freagairt nan ceallan T47D.
- Cleachd dòighean measaidh iomchaidh, leithid Western blot no PCR a-steach fìor-ùine, gus measadh gine no abairt pròtain ann an ceallan T47D air an làimhseachadh.
3. Mion-sgrùdadh dàta:
- Cleachd bathar-bog mion-sgrùdadh staitistigeil gus na toraidhean a gheibhear a mheasadh agus gus brìgh staitistigeil nan eadar-dhealachaidhean a chaidh fhaicinn a dhearbhadh.
- Dèan mion-sgrùdaidhean smachd càileachd agus dearbhaich ath-riochdachadh nan toraidhean a gheibhear a’ cleachdadh loidhne cealla T47D ann an diofar dheuchainnean.
- Dèan aithris gu mionaideach air na dòighean agus na toraidhean a gheibhear, a’ toirt a-steach suidheachaidhean cultar cealla sònraichte, na leigheasan agus na deuchainnean a chaidh a dhèanamh.
C&F
Q: Dè an loidhne cealla T47D?
A: Is e loidhne cealla T47D loidhne cealla a thathas a’ cleachdadh ann an rannsachadh saidheansail a tha a’ tighinn bho carcinoma broilleach daonna.
C: Dè na feartan a tha aig loidhne cealla T47D?
A: Tha an loidhne cealla T47D na loidhne cealla epithelial a thàinig bho tumhair broilleach daonna. Tha e air a chomharrachadh le bhith deimhinneach airson an estrogen receptor (ER) agus a 'cur an cèill an receptor progesterone (PR). A bharrachd air an sin, tha e a’ nochdadh faireachdainn ìosal den phròtain HER2 / neu.
C: Cuin a chaidh an loidhne cealla T47D a stèidheachadh?
A: Chaidh loidhne cealla T47D a stèidheachadh airson a’ chiad uair ann an 1974 le Soule et al.
C: Carson a thathas a’ cleachdadh an loidhne cealla T47D ann an rannsachadh?
A: Tha an loidhne cealla T47D air a chleachdadh sa mhòr-chuid mar mhodail deuchainneach ann an sgrùdaidhean co-cheangailte ri aillse broilleach, gu sònraichte ann a bhith a ’luachadh leigheasan ùra agus tuigse air na h-innealan moileciuil a tha an sàs sa ghalar seo.
C: A bheil an loidhne cealla T47D an aghaidh droga sònraichte sam bith?
A: Thathas den bheachd gu bheil an loidhne cealla T47D mothachail do raon farsaing de dhrogaichean a thathas a’ cleachdadh ann an làimhseachadh aillse broilleach, leithid antineoplastics agus modulators roghnach gabhadair hormona.
C: A bheil caochlaidhean ann de loidhne cealla T47D?
A: Tha, tha diofar subclones de loidhne cealla T47D, leithid T47D-MTVL agus T47D-RelA, a chaidh a leasachadh gus sgrùdadh a dhèanamh air taobhan nas sònraichte de pròiseasan sònraichte bith-eòlasach.
C: Càite am faighear ceallan loidhne cealla T47D?
A: Tha ceallan loidhne cealla T47D rim faighinn bho dhiofar bhancaichean cealla agus solaraichean cultar cealla sònraichte.
Mar cho-dhùnadh
Gu crìch, tha cleachdadh loidhne cealla T47D air a bhith na inneal luachmhor ann an rannsachadh saidheansail agus clionaigeach. Tha a chomas air feartan agus giùlan coltach ri ceallan broilleach daonna a chumail ga fhàgail na mhodail earbsach airson sgrùdadh ghalaran agus leasachadh leigheasan. A bharrachd air an sin, tha cho furasta ‘s a tha e àiteachadh agus cumail suas san obair-lann ga dhèanamh na roghainn goireasach airson deuchainnean mòra.
Tha ìomhaigh hormonail agus ginteil loidhne cealla T47D, a bharrachd air a chomas freagairt a thoirt do dhiofar bhrosnachaidhean agus riochdairean teirpeach, a’ leigeil leinn sgrùdadh a dhèanamh air slighean comharran agus dòighean bunaiteach ann an galairean co-cheangailte ri aillse broilleach. Tha am modail ceallach seo a’ toirt cothrom tuigse fhaighinn air bith-eòlas a’ ghalair a dhoimhneachadh, a bharrachd air a bhith a’ measadh èifeachd agus puinnseanta a dh’fhaodadh a bhith aig drogaichean ùra.
Tha e cudromach a shoilleireachadh, ged a tha loidhne cealla T47D a’ toirt seachad fiosrachadh luachmhor, gum feumar a chleachdadh a bhith air a neartachadh le modalan cealla eile agus sgrùdaidhean clionaigeach gus toraidhean nas cinntiche agus riochdachail fhaighinn. A bharrachd air an sin, tha e riatanach aire a thoirt do na cuingeadan co-cheangailte ri bhith a’ toirt a-mach toraidhean cultar cealla gu eòlas-eòlas daonna.
Ann an geàrr-chunntas, tha an loidhne cealla T47D air a shuidheachadh mar inneal riatanach ann an rannsachadh aillse broilleach. Tha a chomas air atharrais a dhèanamh air feartan cheallan broilleach daonna agus cho sùbailteachd sa tha e san obair-lann a’ toirt cothrom dhuinn eòlas agus leasachadh leigheasan nas èifeachdaiche adhartachadh. Ach, tha feum air tuilleadh rannsachaidh agus co-obrachadh le modalan eile agus dòighean clionaigeach gus tuigse nas coileanta fhaighinn air a’ ghalair iom-fhillte seo.
Is mise Sebastián Vidal, innleadair coimpiutair a tha dìoghrasach mu theicneòlas agus DIY. A bharrachd air an sin, is mise neach-cruthachaidh tecnobits.com, far am bi mi a’ roinn chlasaichean teagaisg gus teicneòlas a dhèanamh nas ruigsinniche agus nas so-thuigsinn don h-uile duine.